Gấu Trúc Panda 2 được tiếp nối từ phần một, khi gấu Po trở thành Thần Long đại hiệp, bảo vệ thung lũng Bình yên cùng những người bạn là Hổ tỷ, Khỉ, Bọ ngựa, Rắn và Hạc. Tuy nhiên, cuộc sống của Po bắt đầu thay đổi khi một nhân vật phản diện mới xuất hiện.
Shen, thái tử chim công, trở về vương quốc với một thứ vũ khí bí mật, nhằm thôn tính Trung Hoa và phá hủy bộ môn võ kungfu cổ truyền. Hắn khống chế dân chúng và thâu tóm quyền lực vào trong tay. Po và Ngũ đại hiệp bắt đầu sứ mệnh mới để bảo vệ cho cả Trung Hoa. Cùng lúc này, quá khứ của gấu Po cũng dần được hé lộ.